4 栗疫病研究
板栗疫病(Cryptonectria paracitica)是國內(nèi)檢疫性病害, 是由子囊菌亞門(Ascomycotina) 的栗疫菌(Cryphonectriaparasitica (Murr.) Barr)引起的一種真菌性病害。對于栗疫病的防治方法目前主要有:選育抗病品種、結(jié)合栽培管理措施綜合防治、接種弱毒力栗疫病菌株。美國農(nóng)業(yè)部曾于1912~1917年和1922~1938年兩次從中國大規(guī)模引種中國板栗,以中國板栗為親本與美洲栗雜交作了大量組合,并且進行了栗疫病基因的遺傳學(xué)研究。目前,在栗疫病菌的分子生物學(xué)研究方面有較快進展,為抗栗疫病基因工程的深入研究奠定了基礎(chǔ)。馮友軍構(gòu)建了攜帶漆酶基因LAC - 1cDNA 和基因組DNA 的大小約8.9kbp 的穿梭表達載體pFC9、該重組質(zhì)?梢栽诎謇跻卟【凶灾鲝(fù)制,在板栗疫病菌低毒菌株EP713 中高效表達出漆酶活性。康寧通過用EP155 單交換隨機整合質(zhì)粒文庫轉(zhuǎn)化栗疫病工程菌株LC1,構(gòu)建了突變體庫,并以孢子形成為標記,從突變體庫中篩選到了一批攜帶病毒且產(chǎn)孢良好的病毒靶基因突變株。對突變基因片段的序列分析表明,該基因(命名為CPTAl)的編碼產(chǎn)物與炭疽菌(Colletotrichumlindmuthianum)中的轉(zhuǎn)錄激活因子CLTAl有64%的同源性和75%的相似性。推測CPTAl可能是低毒病毒的一個靶標,其功能因病毒侵染而發(fā)生改變并且干擾真菌的正常產(chǎn)孢過程。
5 遺傳多樣性研究
近年來,國內(nèi)外對板栗種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究取得了一定進展,分別利用RAPD、ISSR、SSR 和AFLP 等分子標記技術(shù)對板栗栽培品種間的遺傳背景和遺傳基礎(chǔ)進行了多樣性分析,為板栗資源的開發(fā)利用、制定科學(xué)的資源保護策略以及新品種的選育具有重要的指導(dǎo)意義。暴朝霞和黃宏文采用9 個酶系統(tǒng)的15 個同工酶位點,對89個地方板栗品種進行了遺傳多樣性分析,體現(xiàn)了在遺傳構(gòu)成上同地域的板栗品種具有遺傳關(guān)系相近的特點。田華等采用8對微衛(wèi)星分子標記對中國板栗的28個自然居群進行了遺傳多樣性與遺傳結(jié)構(gòu)分析,群體間遺傳分化系數(shù)為0.016~0.278,Mantel 檢測結(jié)果表明,中國板栗居群的遺傳距離與地理距離之間無顯著相關(guān)性。艾呈祥等將每一居群的15 個單株混在一起提取基因組總DNA,對17個不同地理群體的板栗基因組采用10對熒光引物進行SSR 擴增,多態(tài)性位點比率為79.25%,群體間遺傳距離為0.0348~0.3571,產(chǎn)地相距越遠,群體間相似程度越低。利用熒光AFLP 技術(shù),對30 個來自不同地區(qū)的板栗和日本栗品種進行分析,旨在從分子水平上探索板栗品種間的遺傳差異,為合理利用板栗種質(zhì)資源,培育新品種提供分子水平上的理論依據(jù)。中國栗屬資源是世界抗病育種的重要抗源,也是世界各國進行食用栗品種改良的重要基因來源。在世界栗屬資源中占有舉足輕重的地位,對中國現(xiàn)有栗屬資源進行全面調(diào)查,建立一個系統(tǒng)的板栗遺傳多樣性分析平臺,根據(jù)居群結(jié)構(gòu)、分布特點、遺傳多樣性的地域差異的研究結(jié)果,重點保護那些特殊生境群體、具有特殊性狀的品種、在分類與遺傳上具有不可替代的獨特群體及品種等。
6 小結(jié)
中國板栗是一種世界上分布廣泛的重要園藝植物,具有較高的經(jīng)濟價值。板栗不僅是世界上食用栗品種改良的重要遺傳資源,而且在板栗起源與進化研究中發(fā)揮了重要作用,對于世界板栗資源保護和利用方面具有重要意義。充分挖掘中國板栗的資源優(yōu)勢,開展多種選育方法的品種改良,成為栗屬植物資源保護、發(fā)展和可持續(xù)利用的當務(wù)之急。若能從多個水平,借助多種研究手段,對材料進行綜合評價,可以更為準確地評價種質(zhì)資源。