1.2 色譜分析技術(shù)
    色譜分析的基本原理是讓混合物通過(guò)互不混溶的兩相，由于各組分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)不同，因此可以在兩相中進(jìn)行分離。飼料檢測(cè)中應(yīng)用的色譜儀器主要有氣相色譜儀和液相色譜儀。
    我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的飼料中農(nóng)藥殘留如有機(jī)磷(GB/T18969—2003)、除蟲菊酯類(GB/T19372—2003)、氨基甲酸酯類(GB/T19373—2003)等大多數(shù)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)均采用氣相色譜分析方法。隨著飼料中油脂的添加，對(duì)油脂質(zhì)量及種類的檢測(cè)逐漸成為關(guān)注的重點(diǎn)，因此開始應(yīng)用氣相色譜對(duì)飼料中脂肪酸種類及含量進(jìn)行檢測(cè)，以確定飼料中油脂的組成。此外飼料香味劑的檢測(cè)主要包括對(duì)其香氣、理化指標(biāo)、穩(wěn)定性和有效性等進(jìn)行檢測(cè)，由于香味劑是非常復(fù)雜的化合物，在國(guó)外多采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行定性定量分析。我國(guó)對(duì)香味劑的堿性主要是對(duì)其中味料部分的一些成分進(jìn)行檢測(cè)，如谷氨酸鈉、肌苷酸、鳥苷酸、糖精鈉、葡萄糖等采用高效液相色譜方法進(jìn)行檢測(cè)；對(duì)于香氣部分如含有丁酸乙酯、乳酸乙酯、香草醛等成分采用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)。飼用防霉劑目前國(guó)內(nèi)外普遍采用氣相色譜或高效液相色譜方法進(jìn)行檢測(cè)，有些方法直接采用食品添加劑檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法，例如飼用防霉劑中的脂肪酸類物質(zhì)，包括甲酸、乙酸、丙酸、山梨酸、苯甲酸等采用氣相色譜技術(shù)，用有機(jī)溶劑丙酮/石油醚等提取，經(jīng)過(guò)離心凈化，通過(guò)色譜柱或毛細(xì)管柱的分類，用電子捕獲、氫焰等檢測(cè)器進(jìn)行定量測(cè)定。飼用抗氧化劑是添加到飼料中，能夠阻止飼料或延遲飼料氧化，提高飼料穩(wěn)定性和延長(zhǎng)貯存期的一類物質(zhì)，常用的有乙氧基喹啉、二丁基羥基甲苯(BHT)、丁基羥基茴香醚(BHA)等。對(duì)于抗氧化劑的檢測(cè)技術(shù)多采用高效液相色譜或氣相色譜技術(shù)進(jìn)行分析。如飼料中BHA、BHT的檢測(cè)采用液相色譜技術(shù)，經(jīng)乙烷溶解提取、乙腈萃取濃縮，異丙醇稀釋后注入高效液相色譜儀中進(jìn)行分離檢測(cè)，用紫外檢測(cè)器進(jìn)行定量分析。乙氧基喹啉、BHT也可以采用氣相色譜方法，經(jīng)毛細(xì)管柱分離，用氫焰檢測(cè)器測(cè)定其含量。
    液相色譜在飼料檢測(cè)中的應(yīng)用十分廣泛，例如飼料中維生素的反相高效液相色譜分析方法已經(jīng)列為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)分析方法。氨基酸的檢測(cè)從以氨基酸分析儀為主逐步轉(zhuǎn)向普遍采用的高效液相色譜方法：經(jīng)鄰苯二甲醛(OPA)和異硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生后，經(jīng)C18柱分離，紫外或熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。該方法的分析時(shí)間短，靈敏度高，極易在大中型飼料廠中普及應(yīng)用。液相色譜還廣泛應(yīng)用于飼料中藥物的檢測(cè)，隨著國(guó)家對(duì)飼料安全問(wèn)題的重視，飼料標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)組織制定了大批飼料中違禁藥物的檢測(cè)方法，如飼料中鹽酸克倫特羅、呋喃唑酮、磺胺喹惡啉、磺胺二甲基嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、鹽酸氯苯胍等，飼料中西馬特羅、地西泮、苯巴比妥、氯丙嗪、己烯雌酚、雌二醇、玉米赤霉烯酮、氫化可的松、氯霉素、金霉素、土霉素、氯苯胍、喹乙醇、莫能菌素、拉沙絡(luò)西鈉、桿菌肽鋅、氯羥吡啶、尼卡巴嗪、鹽霉素、林可霉素、百里霉素、鹽酸氨丙啉、二甲硝咪唑等等，大部分采用液相色譜或液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析。此外，也進(jìn)行了一些飼料中藥物尤其是違禁藥物的分析研究工作，如Wang等(2010)通過(guò)固相萃取等凈化技術(shù)，對(duì)飼料中硝呋烯腙進(jìn)行液相色譜分析，檢出限達(dá)到0.05mg/kg，定量限為0.2mg/kg。對(duì)飼料中多種藥物的同步檢測(cè)分析是現(xiàn)今飼料分析技術(shù)的主流方向之一。Shen等(2009)應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳測(cè)定了飼料中5種苯并咪唑類藥物，檢出限低于2mg/kg，所有藥物的回收率均大于73%，變異系數(shù)低于10%。Galarini等(2009)應(yīng)用液相色譜熒光檢測(cè)器和紫外檢測(cè)器檢測(cè)了飼料中的11種喹諾酮類藥物，檢出限為0.04~0.8mg/kg，回收率為69%~98%，變異系數(shù)低于10%。Driver等(2009)用柱后衍生離子交換色譜熒光檢測(cè)了飼料中的新霉素B和新霉素C，在治療劑量的飼料產(chǎn)品中新霉素含量范圍為50%~0.005%(質(zhì)量比，以新霉素為基礎(chǔ)計(jì))時(shí)，新霉素B平均回收率是100.4%，變異系數(shù)2.28%，新霉素C的回收率是97.5%，變異系數(shù)4.36%，均有良好的分析效果。
    應(yīng)用液相色譜對(duì)飼料調(diào)質(zhì)劑的檢測(cè)分析逐漸推廣。飼料調(diào)色劑或者著色劑有天然提取的色素和人工合成色素，主要采用液相色譜儀器進(jìn)行定量分析。如飼料中葉黃素的檢測(cè)，目前精確測(cè)定的最可靠方法是高效液相色譜方法，根據(jù)1984年美國(guó)公職分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)提出柱層析色譜法測(cè)定總?cè)~黃素，直接用分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。我國(guó)2008年上半年出臺(tái)了飼料添加劑葉黃素檢測(cè)的國(guó)家推薦標(biāo)準(zhǔn)GB/T21517—2008，比柱層析方法更加簡(jiǎn)單，操作步驟少，大大提高了葉黃素檢測(cè)工作的推廣。

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