食品和飼料中三聚氰胺檢測方法有哪些？
2三聚氰胺的檢測方法
三鹿奶粉事件后，我國迅速出臺了奶粉和飼料中的三聚氰胺檢測方法，《GBT22388-2008原料乳及乳制品中三聚氰胺檢測方法》和《NYT1372—2007飼料中三聚氰胺的測定》。實際檢測中發(fā)現(xiàn)某些樣品雖然沒有檢出三聚氰胺，但可以發(fā)現(xiàn)其類似物。我國只檢測三聚氰胺，而美國、日本等國要求同時檢測三聚氰胺及其同系物。胺和酸為二類化合物，很難同時分析，二次檢測成本和時間不容許。美國FDA采用ZIC-HILIC色譜柱pH梯度和濃度梯度LC-MS法實現(xiàn)了二者的同時檢測。到目前為止，三聚氰胺的檢測方法有傳統(tǒng)的苦味酸法和升華法，還有電位滴定法、色譜法、色譜-質譜聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫法、毛細管電泳法、近紅外吸收法等。
2.1苦味酸法與升華法
苦味酸法三聚氰胺完全升華后，稱其殘渣量，即測得三聚氰胺純度。這兩種方法準確度均較高，且對儀器要求較低，但操作繁瑣，分析時間太長，不適合于生產中間控制分析中測定溶液中三聚氰胺的含量。
2.2電位滴定法
電位滴定法原理是先測定三聚氰胺溶液中總固體的含量，用硫酸標準溶液滴定熱溶液至pH為5，流水冷卻溶液至室溫，滴定直至pH為3。根據消耗硫酸標準液的體積計算結果。該法操作簡便，結果準確，但不適于現(xiàn)場和多個樣品的檢測。食品基質中化學組成比較復雜，運用此法時準確度會受到影響。陳一虎對同一試樣進行多次平行測定，測定結果的變異系數為0.98%，在試樣中加入標準樣品0.12500g進行回收率實驗，回收率在89.28%至93.80%之間。
2.3試劑盒檢測法(酶聯(lián)免疫法，ELISA)
ELISA是用三聚氰胺HRP酶耦合物作為標準品，與樣品中萃取的三聚氰胺同時放入多孔試劑板上。經過30min的培養(yǎng)，樣品中的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物與三聚氰胺抗體競爭性結合。經過這30min的培養(yǎng)，任何沒有結合的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物將被沖洗掉，顯色酶底物加入微孔中，任何結合的酶耦合物都會使液體呈現(xiàn)藍色。等反應結束后，用酶標儀讀數，再將未知樣品的讀數和標準品的讀數比較，就能得出樣品中的三聚氰胺濃度。酶聯(lián)免疫法可以滿足日常食品衛(wèi)生執(zhí)法中檢測三聚氰胺項目的要求，具有低成本、高通量檢測三聚氰胺項目的優(yōu)勢，每次能檢測多個樣品，這是其他三聚氰胺檢測方法所無法比擬的，而且不需要非常昂貴、復雜的儀器，樣品制備過程簡捷，技術操作方便，檢測時間不超過2h，檢測范圍為20～500ng/mL。但是檢測樣品中如果存在與三聚氰胺類似的物質，則有可能會干擾實驗結果，需要采用HPLC、HPLC-MS、GC-MS方法做進一步的精確分析。目前，進口的三聚氰胺ELISA檢測試劑盒，有BeaconAnalyticalSystems公司的BeaconMelaminePlateKit、Abraxis公司的MelaminePlatekit、StrategicDiagnostics公司的EnviroGardTriazinePlatekit等。國產的三聚氰胺ELISA檢測試劑盒有中國農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測技術研究所開發(fā)的檢測三聚氰胺的酶聯(lián)免疫試劑盒等。
2.4液相色譜檢測法
液相色譜法可對食品和飼料中三聚氰胺進行定性和定量分析，具有操作簡單、靈敏度高，測定周期短等優(yōu)點。陳垂鳳用高效液相色譜法建立了乳制品中三聚氰胺的檢測方法。采用XBP-C8柱(250.0mm×4.6mm，5.0μm)，流速為1.0mL/min，柱溫為40℃，進樣量為20μL，流動相為檸檬酸+辛烷磺酸鈉+乙腈+堿性水(25.000%～28.000%的NH3•H2O調pH為3.0)。測定線性范圍為2.00～10.00mg/kg。
吳彩梅等建立采用固相萃取凈化，高效液相色譜法測定雞蛋中三聚氰胺含量的方法。樣品采用三氯乙酸和乙酸鉛溶液提取，經優(yōu)化實驗，確定樣品提取20min，采用C-C18(4.6mm×
150mm，5μm)色譜柱和PCX固相萃取柱。采用紫外檢測器，檢測波長為240nm，流動相為乙腈:辛烷磺酸鈉-檸檬酸緩沖液(10:90，v/v)，流速1.0mL/min，進樣量20μL，外標法定量。三聚氰胺在1～50μg/mL范圍內，具有良好的線性關系，在添加質量濃度為5～20mg/kg范圍內，三聚氰胺添加回收率在72.8%～87.6%，RSD(n=6)為1.5%～4.0%，最低檢測限為0.54mg/kg。