(1)根據(jù)文獻(xiàn)資料,設(shè)計(jì)并合成MHC-DRB1基因的特異性引物,通過(guò)巢式PCR方法,已經(jīng)成功地從綿羊的基因組DNA中,擴(kuò)增出MHC-DRB1基因第二外顯子片段(296 bp);分別選取限制性內(nèi)切酶SacⅠ、Hin1Ⅰ和 HaeⅢ,對(duì)MHC-DRB1基因第二外顯子,進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn),兩個(gè)綿羊品種,在三個(gè)限制性內(nèi)切酶SacⅠ、Hin1Ⅰ和 HaeⅢ中,分別發(fā)現(xiàn)2、2、6個(gè)等位基因和3、3和19個(gè)基因型;(2)根據(jù)文獻(xiàn)資料,設(shè)計(jì)并合成MHC-DQB基因的特異性引物,通過(guò)PCR方法,已經(jīng)成功地從綿羊的基因組DNA中,擴(kuò)增出MHC-DQB基因第二外顯子片段(280 bp),分別選取限制性內(nèi)切酶TaqⅠ、 MvaⅠ和 HaeⅢ,對(duì)MHC-DQB基因第二外顯子,進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn);酶切實(shí)驗(yàn)已經(jīng)完成,數(shù)據(jù)正在統(tǒng)計(jì)之中,在MvaI,HaeⅢ and NciI的酶切實(shí)驗(yàn)中,出現(xiàn)了新的等位基因,經(jīng)過(guò)克隆測(cè)序,發(fā)現(xiàn)新的突變位點(diǎn)。
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