近年來(lái)很多免疫過的豬場(chǎng)仍發(fā)生豬瘟,并以由豬瘟病毒持續(xù)性感染所致的溫和型(非典型)及繁殖障礙多見,給養(yǎng)豬生產(chǎn)造成巨大的損失,因此,正確、及時(shí)的診斷和采取綜合性防制措施控制豬瘟在現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)上有著十分重要的意義。江門市某豬場(chǎng)曾經(jīng)由于豬瘟病毒的持續(xù)性感染而得不到及時(shí)確診與有效控制,造成母豬早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、不孕,以及前后死亡仔豬達(dá)780多頭。經(jīng)確診并采取有效的綜合性防制措施后疫情得到了全面控制。
發(fā)病情況
江門市某豬場(chǎng)飼養(yǎng)母豬150頭,育肥豬1600多頭(其中部分仔豬系從外場(chǎng)購(gòu)入),存欄仔豬400多頭。1996年6月開始發(fā)現(xiàn)有部分母豬出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)、弱胎、不孕等繁殖障礙現(xiàn)象,或產(chǎn)出的仔豬全身顫抖、體質(zhì)虛弱、皮膚有出血性斑點(diǎn),多于產(chǎn)出后數(shù)小時(shí)至3天內(nèi)死亡,同窩仔豬基本全部發(fā)病。從7月份開始,20日齡以上的哺乳仔豬及斷奶保育仔豬也陸續(xù)發(fā)病,8-10月份發(fā)病率、病死率達(dá)到高峰。至1997年3月,該場(chǎng)前后死亡仔豬達(dá)780多頭。但自始至終,同場(chǎng)之育肥豬無(wú)一例發(fā)病,母豬除發(fā)生繁殖障礙外,均未出現(xiàn)其它明顯的臨床癥狀。根據(jù)病豬的臨床表現(xiàn)與剖檢病變,該場(chǎng)獸醫(yī)懷疑是由豬瘟所致。因此先后采取了超前免疫、調(diào)整免疫程序、加大豬瘟疫苗免疫劑量(5頭份,以往劑量為1-3頭份)等措施,但收效不大,疫情未得到有效控制。
臨床癥狀與剖檢變化
發(fā)病仔豬多表現(xiàn)為慢性經(jīng)過,如患豬不食或少食,精神萎靡,不愿走動(dòng),體溫持續(xù)在41℃左右,眼瞼內(nèi)側(cè)有較多分泌物,便秘和下痢交替出現(xiàn),粒狀糞便表面附有粘液。皮膚有較多出血性斑點(diǎn),患病后期,病豬尾尖、耳根、背部、四肢末梢、公豬陰囊、腹下等部位出現(xiàn)紅紫色斑點(diǎn),個(gè)別公豬包皮積尿。病程為10-30天。
剖檢變化主要表現(xiàn)為全身淋巴結(jié)腫大、出血,呈暗紅色,切面多法,個(gè)別豬只喉頭粘膜水腫,有散在出血點(diǎn),肺有出血點(diǎn),腎臟色淡,皮質(zhì)部有出血斑點(diǎn),膀胱粘膜有多量散在出血點(diǎn),脾臟周邊有出血性梗死灶。
實(shí)驗(yàn)室診斷
1、RT-PCR診斷 取病豬脾、腎組織提。遥危,用豬瘟病毒特異性引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增豬瘟病毒E2基因,均能獲得預(yù)期基因片段,且重復(fù)性良好。
2、豬瘟熒光抗體染色診斷 取病豬扁桃體、脾、腎作組織觸片,丙酮固定,用豬瘟熒光抗體(由中國(guó)獸藥監(jiān)察所提供)染色,在熒光顯微鏡下檢查,可見較多量細(xì)胞漿中有翠綠色熒光,呈陽(yáng)性反應(yīng)。
。场(dòng)物回歸試驗(yàn) 取新生即發(fā)病仔豬及產(chǎn)出的死胎的脾、淋巴結(jié)、腎組織制成1:10組織懸液,經(jīng)抗生素自理后,在封閉隔離的狀態(tài)下按1ml/頭接種健康仔豬3頭(來(lái)自健康場(chǎng)、母豬未注射過豬瘟疫苗并經(jīng)豬瘟抗體檢測(cè)陰性)。接種后48-72小時(shí)開始,豬只體溫升高至40.5-41.3℃,食欲下降,72-96小時(shí)皮膚開始出現(xiàn)出血性斑點(diǎn)。第6天宰殺剖檢,各組織器官的變化呈較明顯的豬瘟病變。取血液、扁桃體、脾臟、腎臟、淋巴結(jié)作RT-PCR檢查以及制成組織觸片作豬瘟熒光抗體染色,均呈明顯的豬瘟陽(yáng)性反應(yīng)。取脾臟、淋巴結(jié)制成組織懸液,經(jīng)無(wú)菌及離心自理后接種RK-15細(xì)胞,接毒細(xì)胞作豬瘟熒光抗體染色,在熒光顯微鏡下,可見較多量細(xì)胞漿中有翠綠色熒光,呈陽(yáng)性反應(yīng)。
防治措施
該場(chǎng)疫情經(jīng)筆者確診后,主要采取了以下措施:
。、凈化種豬群 將有繁殖障礙現(xiàn)象并經(jīng)扁桃體觸片作豬瘟熒光抗體染色呈陽(yáng)性反應(yīng)的母豬挑出并淘汰,先后淘汰母豬46頭。淘汰本場(chǎng)種公豬,外購(gòu)優(yōu)質(zhì)精液實(shí)行人工授精。
。、全場(chǎng)緊急強(qiáng)化免疫 將全場(chǎng)出現(xiàn)癥狀的仔豬挑選出來(lái)集中隔離飼養(yǎng)。然后選用優(yōu)質(zhì)豬瘟兔化弱毒疫苗對(duì)全場(chǎng)2周齡以上的仔豬、種豬及育肥豬實(shí)行緊急強(qiáng)化免疫,免疫劑量按育肥豬10頭份、仔豬15頭份、母豬20頭份進(jìn)行一次性注射。先注射無(wú)癥狀豬,最后注射有癥狀豬。對(duì)病死豬及時(shí)清理、消毒并作深埋處理。
。、制定合理免疫程序與劑量 本次疫情平息后將該場(chǎng)正常的豬瘟免疫程序調(diào)整為:母豬每次配種前注射豬瘟兔化弱毒疫苗5-10頭份,20日齡仔豬5頭份,50日齡仔豬5頭份。
4、其他防制措施、龠x用碘類消毒劑對(duì)全場(chǎng)欄舍進(jìn)行一次徹底消毒,以后隔日1次。疫情平息后改為每周2-3次。同時(shí)嚴(yán)格限制人員進(jìn)出豬場(chǎng)。②對(duì)隔離的病豬,連續(xù)1周給予抗生素和解熱鎮(zhèn)痛藥以控制繼發(fā)感染。
采用上述措施10天后,該場(chǎng)未見新的病例出現(xiàn),疫情基本得到控制。多年來(lái)隨訪未再發(fā)生過豬瘟疫情。
討論與體會(huì)
。薄㈦m然我國(guó)現(xiàn)用的豬瘟兔化弱毒疫苗對(duì)預(yù)防目前流行的豬瘟病毒仍是安全有效的,但以往評(píng)價(jià)疫苗免疫效果及制定免疫標(biāo)準(zhǔn)通常是以防止臨床感染為標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用這一標(biāo)準(zhǔn)時(shí),常有部分豬免疫后,抗體水平不能達(dá)到防止亞臨床感染。此種亞臨床感染豬雖無(wú)明顯癥狀,但在其存活期終生帶毒、散毒,為豬瘟病毒的主要宿主。因此,疫苗應(yīng)以能防止臨床感染為標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床表現(xiàn)、病理變化以及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,筆者認(rèn)為該場(chǎng)的豬瘟主要是由母豬長(zhǎng)期帶毒,處于豬瘟病毒持續(xù)性感染狀態(tài)并將病毒傳給仔豬所引起的,病毒毒力屬于中低水平。
。病⒂貌煌瑒┝康呢i瘟兔化弱毒疫苗免疫豬,證實(shí)免疫劑量與保護(hù)水平密切相關(guān),適當(dāng)提高免疫劑量有利于提高抗體水平,同時(shí)加大劑量亦可中和一定的母源抗體。劑量不足時(shí),攻毒后不能阻止強(qiáng)毒在體內(nèi)復(fù)制和帶毒。免疫劑量提高到80-100PID50(約320-400。遥桑,RID為兔體反應(yīng)量),攻毒后能制止亞臨床感染,所有耐過的豬只均不帶毒。目前歐洲為消滅豬瘟亞臨床感染,多采用加大免疫劑量的方法。歐洲藥典規(guī)定用C株疫苗時(shí),骨肉注射劑量為100。校桑模担埃ǎ矗埃啊。遥桑模N覈(guó)豬瘟細(xì)胞苗出廠檢驗(yàn)以5萬(wàn)倍稀釋能致兔體熱反應(yīng)為合格,即每毫升原液含5萬(wàn)RID。規(guī)定的免疫劑量為150。遥桑模鬯銥椋常罚校桑模担。這一劑量遠(yuǎn)低于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),顯然在豬瘟發(fā)病不穩(wěn)定地區(qū)應(yīng)用這一劑量,不足以切斷豬瘟亞臨床感染,在養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)用適當(dāng)加大免疫劑量,尤其是在有豬瘟存在的地區(qū)。盡管該場(chǎng)使用的豬瘟兔化弱毒疫苗后經(jīng)實(shí)驗(yàn)室按規(guī)程檢測(cè)是合格的,但原使用1-3頭份/次免疫未能有效控制豬瘟野毒的亞臨床感染,而在發(fā)生疫情后改用5-10頭份/次的免疫劑量證明效果良好。
3、加強(qiáng)豬瘟免疫監(jiān)測(cè),弄清群體的免疫水平和疫苗免疫效果,是制定合理的免疫程序的基本前提。同時(shí),應(yīng)用免疫監(jiān)測(cè)結(jié)合豬瘟病毒抗原檢測(cè),可隨時(shí)掌握豬群的免疫狀態(tài),制定適合于本豬場(chǎng)的免疫程序,并隨時(shí)淘汰免疫耐受豬(疫苗接種后不產(chǎn)生或僅產(chǎn)生低水平抗體的豬),保持豬群的整體免疫,堅(jiān)決淘汰隱性感染或潛伏感染的種公豬和母豬,消除引起仔豬感染和免疫耐受的傳染源。
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